回答：1、準備工具：準備鑷子、EP管、槍頭等工具，然後用高壓滅菌鍋進行殺菌。2、消毒處理：用酒精對手掌、鑷子進行消毒，然後取出10支EP管放入試劑盒內。3、放入菌種：用移液槍取出甘油，放入EP管，然後再將菌種放入管內。4、低温保存：蓋好蓋子，做好標註，將所有菌種都裝到袋中，再將袋子置於冰箱內保存。
一、甘油保藏菌種實驗步驟
1、準備工具
準備好鑷子、EP管、槍頭等工具，然後將其放入高壓滅菌鍋內做殺菌處理。
2、消毒處理
將酒精擦拭在手上進行消毒，並對鑷子做消毒處理，再用鑷子取出10支EP管並放入試劑盒中。
3、放入菌種
用移液槍取出50%的甘油，然後放入EP管中，再取出菌種放入EP管。
4、低温保存
蓋上蓋子，並做好標註，然後將所有菌種都裝到袋子中（袋子也要做好標註），再將袋子放在-20℃的冰箱內保存。
二、甘油保藏菌種原理
1、保藏原理
甘油可以作為菌種的保護劑，低温冷凍的條件下，使微生物的新陳代謝趨於停止，從而達到長期有效的保藏目的（保藏温度越低，效果越好）。
2、注意事項
（1）應使用非選擇性的增菌培養基，因為微生物在選擇性培養基中生長時可能會丟失某些生物特性，而且保藏的菌種的生物特性可能和標準菌株的特性有所差異。
（2）菌液的濃度越大，菌種的保存時間一般越長。保藏細菌常使用菌液，保藏黴菌常使用無菌水，或用生理鹽水製備成的孢子懸液。
（3）甘油的最終濃度為10-20%。甘油原液過於粘稠，需配製適宜的甘油水溶液，將菌懸液和甘油按照1：1的體積比例充分混勻，再分裝至經過滅菌處理的保藏管中，放入-80℃（-70℃）的冰箱內保存。
（4）該方法適合中長期菌種保藏，保藏時間通常是2-4年左右。
