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食用菌菌種的貯藏技術

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食用菌菌種的貯藏技術

5、自然基質保藏法

(1)麥粒保藏法:取無癟粒、無雜質的小麥淘洗乾淨,浸泡12—15小時,加水煮沸15分鐘,繼續熱浸15分鐘,使麥粒脹而不破,瀝乾水分攤開晾曬,使麥料的含水量在25%左右。將碳酸鈣、石膏拌入熟麥粒中(麥粒、碳酸鈣、石膏比例為10公斤:133克:33克),拌和均勻後裝入試管中,每管約2—3克,然後清洗試管,塞棉塞,滅菌1.5(1.5公斤/平方釐米,2小時),經無菌檢查合格後備用,試管基質冷卻後接種,適温培養,持菌比長滿基質後用石蠟塗封棉塞,放低温保藏。2年左右轉接一次。

(2)麩曲保藏法。取新鮮麩皮,過60目篩除去粗粒。將麩皮和自來水按1:1拌勻,裝入小試管,每管約裝1/3高度,加棉塞用紙包紮,高壓滅菌(1.5公斤/平方釐米,30分鐘),經無菌檢查合格後備用,將生長在斜面培養基上的健壯菌種,移種至無菌麩曲管中,移川時注意儘管搗勻小試管中的麩皮,呈疏鬆狀態,在適温下培養至菌絲長滿麩皮為止,將麩曲小管置乾燥器中,在低温或適温下保藏。

6、生理鹽水保藏法。取純氯化鈉0.7—0.9克,放入100%毫升蒸餾水中,攪拌均勻分裝試管,每管5—10毫升,進行滅菌(1公斤/平方釐米,30分鐘),經無菌檢查合格後備用,將待保藏的菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養中適温振盪培養5—7天。無菌操作吸取少許培養菌種注入經檢驗合格的生理鹽水試管中,塞上無菌橡皮塞,用石蠟塗封,在室温或低温保藏。

7、冷凍真空乾燥法。將已培養、生長豐富的菌體或孢子懸浮於滅菌的血清、卵白、脱脂奶製成菌懸液,將懸液以無菌操作分裝於滅菌的玻璃安瓿瓶中,每管約0.3—0.5毫升,然後用耐壓像皮管與冷凍乾燥裝置連接,安瓿瓶放在冷凍槽中於-30℃至-40℃迅速冷凍,並在冷凍狀態下抽空乾燥,並在真空狀態下溶封安瓿,在-20℃保存,一般可保存十年以上,但成本較高。

8、液氮超低温保藏法。首先將要保藏的菌種製成菌懸液備用;其次,準備安瓿瓶,每瓶加入0.8毫升冷凍保護劑10%(體積比)甘油蒸鎦水溶液,塞棉塞滅菌(1公斤/平方釐米,5分鐘)。無菌檢查後,接入要保藏的菌種,火焰溶封瓶口,檢查是否漏氣,將封好口的安瓿瓶放在凍結器內,以每分鐘下降1℃的速度緩慢降温,使保藏品逐步均勻地凍結,直至-35℃,以後凍潔速度就不需控制,安瓿凍結後立即放入液氮罐內,在-150至-196℃保藏,該法只有少數科研院所使用。