金針菇栽培中培養室的溫度在零上十攝氏度最為適宜。
菌絲培養菌絲培養又稱培菌、養菌發菌，發菌的最適溫度為25℃，由於料溫比室溫高2—4℃，所以接種後的室溫要控制在18—20℃即可，環境溫度偏高時，袋子的排入密度要稀，要避光、通風、降溫，防止菌溫過度而灼燒菌絲，空氣相對溼度以60%左右為宜無加溫條件，培養室要減為通風，穩定室溫，保持弱光和黑暗環境，袋的排放密度要高，以提高菌溫加快發菌，避免菌絲來培養好就過早出菇，接種後2—3天，菌絲開始萌發，接種7—8天后，菌絲吃料蔓延一般40—50天，菌絲就能長滿袋，每隔10天左右，將栽培袋上下對換位置，使發菌一致，發菌期間，要及時撿出染菌袋，根據汙染程度不同另行放置或銷燬。
溫度是影響金針菇生長的另外一個重要因素。金針菇菌絲在4-32℃的範圍內均可生長。低於3℃或高於34℃時都會停止生長。溫度8℃以上時生長速度逐漸加快。22-26℃為菌絲生長最適範圍。子實體生長最適溫度為12-15℃。在10℃和15℃條件下，子實體形成只須13天。
