金针菇栽培中培养室的温度在零上十摄氏度最为适宜。
菌丝培养菌丝培养又称培菌、养菌发菌，发菌的最适温度为25℃，由于料温比室温高2—4℃，所以接种后的室温要控制在18—20℃即可，环境温度偏高时，袋子的排入密度要稀，要避光、通风、降温，防止菌温过度而灼烧菌丝，空气相对湿度以60%左右为宜无加温条件，培养室要减为通风，稳定室温，保持弱光和黑暗环境，袋的排放密度要高，以提高菌温加快发菌，避免菌丝来培养好就过早出菇，接种后2—3天，菌丝开始萌发，接种7—8天后，菌丝吃料蔓延一般40—50天，菌丝就能长满袋，每隔10天左右，将栽培袋上下对换位置，使发菌一致，发菌期间，要及时捡出染菌袋，根据污染程度不同另行放置或销毁。
温度是影响金针菇生长的另外一个重要因素。金针菇菌丝在4-32℃的范围内均可生长。低于3℃或高于34℃时都会停止生长。温度8℃以上时生长速度逐渐加快。22-26℃为菌丝生长最适范围。子实体生长最适温度为12-15℃。在10℃和15℃条件下，子实体形成只须13天。
